La combinación de eosina y nigrosina se usa para la tinción supravital para las células de espermáticas de todos los mamíferos domésticos. La tinción produce un contraste más fuerte en comparación con la tinción con eosina: las células de esperma muertas con una membrana plasmática dañada son coloreadas por Eosina, mientras que las células vivas no absorben la tinción. La nigrosina crea un fondo oscuro, lo que simplifica la evaluación. Esta tinción no es adecuada para el análisis de esperma congelado descongelado que contiene glicerol.